第三十章 磕磕绊绊地起步

林萧然轻轻摇头，他已经打定主意，以后再与师姐打交道，虽可以继续刺激对方，撩拨火气，却要更加慎重，像这种给自己带来无限麻烦的事情，万万不能重现！

这一次他确实爽了，也获得了自尊心点，可是收拾烂摊子也着实头痛，好像是以本伤人，最后弄得一地鸡毛。

林萧然细胞培养的见识远超黄薇，尽管对方看似存在刁难的意思，他也不会真正感到为难，只是稍一思虑，就想到应对之策。

“我们目前拥有的是原发细胞，培养方案亟待探索，却不一定要设定单一目标，可以同时引入细胞膜物质运输加以研究，如此一来，将大幅度提高实验效率，你以为如何？”

黄薇听罢，眼前微露光芒，口中喃喃，“课题是细胞悬浮驯化及贴壁和悬浮状态膜运输研究，原发细胞贴壁生长，已经可以着手研究贴壁状态细胞膜运输特性，待实现细胞悬浮驯化，再完成余下实验，可是，细胞培养条件尚未优化，火急火燎进行这一步，有意义吗？”

“影响肯定存在，但没有多么严重，最终取得的数据仍在许可范围之内，那点影响完全可以忽略！”

有关细胞的膜运输，乍听起来很高大上，弄清原理就会发现没有多么玄奥，简单说来，膜运输是指将细胞外界物质输送至细胞内，或细胞内物质排出细胞的过程！

细胞膜控制着一切物质的进出，比如细胞生长所须的养料，要经由细胞膜进入胞内，代谢终产物同样需要经细胞膜排至胞外，细胞膜是细胞最关键的屏障与门户。

细胞膜的结构非常简单，由两层磷脂分子构成，中间嵌有特定蛋白，它非常薄，仅七纳米左右，与高端芯片电路仿佛！

细胞膜如何控制物质进出呢？

通常情况下，绝大多数小分子，比如水、多数离子、氨基酸及维生素，可以按照细胞内外环境的浓度差，自由扩散穿过细胞膜，而钾、钠、钙等重要离子及大分子，如蛋白，要通过主动运输进入细胞。

很好理解，比如生活在大海中的鱼，海水虽然很咸，鱼肉含盐量却并不高，这就是细胞膜的功劳，限制了盐的随意渗入，可以说没有细胞膜，大海将不可能存在生物。

我们一般认为，贴壁生长的细胞，膜运输的能力弱于悬浮培养，而初始细胞均以贴壁形式生长，这也是为什么在细胞培养中，要进行细胞的悬浮驯化，目的在于提升膜运输效率。

“唉，提起膜运输实验，我的心里就是一阵烦闷，仔细想想，又觉得你说得没错，这两天看了一些相关资料，虽然还没有仔细研究，但明白无论工作量还是实验难度，提升了不止一个级别，以后有得苦吃喽！”

“也不用特别担心，因为许多实验的重复性很强，只要熟练之后，就会发现并不是想象中那么困难，同时，我们也要有自知之明，清楚自己的定位，研究要有选择性，论文有说服力就好，不必追求完美，不必贪多……，否则容易撑着！”林萧然微笑道。

“有选择性？”黄薇微微思索，随后拉开抽屉取出一摞文本，都是些没有整理的初始文献，“这是些有关维生素、氨基酸、葡萄糖和蛋白等，膜运输方面的文献，你觉得怎样取舍？”

“有机的，无论小分子还是大分子，实验室没那个条件，舍了吧，只做溶解氧与钾离子好了！”林萧然早有决断，选出两项最容易实现的研究对象！

可供研究膜运输效率的对象很多，无论自由扩散方式，比如水、氧气等，或者主动运输进入细胞的物质，如钾、钠、钙及蛋白等，都可供选择，不可否认，研究对象越多，实验结果就越有说服力。

那么，是否应将更多因素纳入研究对象？

这么想当然没有问题，只可惜，条件所限，即使愿望很美好，也必须慎之又慎，原因很简单，人力物力消耗不起！

选择溶解氧监测是因为比较容易实现，细胞培养中，利用氧电极可以轻松获得溶解氧数据，再以时间为x轴溶解氧为Y轴，很容易绘制溶解氧曲线，得出结论。

但溶解氧数据相对粗放，参考性较差，很难得出我们需要的结论，只能作为辅助参考数据，与之相比，我们更关心主动运输数据，如钾、钠、钙等离子的迁移，实验中，可以预设培养基特定离子浓度，接下来按时检测，可以得到相应数据。

钾、钠、钙等离子的检测同样繁琐，大家都知道，钾、钠属于碱金属，它们不容易形成沉淀，需要通过特殊的方法检验，具体过程不再赘述，总之相当繁琐。

而钙离子虽然容易沉淀，但它也容易络合，检测时，很难判定哪部分沉淀，哪部分转化成为络合物，同样不易获得有效检测结果，不是很好的研究对象，没有能力的情况下只能放弃。

生物反应的重现性比较差，加之实验条件简陋，每一项数据会呈现较大的发散性，若选取研究对象太多，黄薇很难在毕业前得出有效结论，最现实的做法是尽可能精简实验，如此一来，论文虽然不是多么好看，最起码不会影响毕业。

黄薇的性格是很傲气的，加之也翻阅了一些资料，有了一定见识，可是以她那点可怜的知识储备，在小师弟林萧然面前，依然无法提出多少反对意见，多数时候都在木然点头。

做通了黄薇的工作，接下来的事情就简单了，他们很快进入实验讨论环节，也算不上讨论，因为多数情况下都是林萧然在说，黄薇在听。

细胞实验说起来简单，真正准备起来也相当繁琐，简而言之，实验准备工作可以分为两部分。

其一是材料，关键是细胞，细胞已经到手，但试剂、设备等也不容忽视，任何一项出现纰漏，都会影响实验的进展。

试剂也不是那么简单，比如培养基，细胞培养基与微生物培养基存在着显着的差异，配方之类不提，单纯灭菌过程就完全不同。

微生物的灭菌，通常采用高压灭菌锅，121c、15分钟即可，非常简单，但细胞培养基就比较麻烦，只因许多成分不耐高温，只能采取过滤方法隔离杂菌。

细胞培养基的准备，过滤同样至关重要！

另外，细胞培养所需的条件也有别于微生物培养，它需要使用二氧化碳培养箱，而二氧化碳要提前到器材科领取！

细胞培养基所需的牛血清和各种维生素等，器材科肯定没有，不急的话可以在器材科报备，等它采购，但是器材科的办事效率低到让你怀疑人生，好吧，最好自己联系商家直接购买！

检测同样需要大量试剂，都需要准备妥当，否则实验开始了，却又发现短缺某些试剂，到时候只有哭的份儿了，无法检测，就意味着实验白做！

实验方法同样关键，实验方法也是对实验过程的描述，它的存在不仅可以规范实验，还可以在一定范围内发现其中疏漏，实验步骤描述得越详实，出现疏漏的机率就越低。

材料方面此时肯定无法处理，两人开始起草实验方法，起草工作由黄薇一人承担，这也是林萧然特别强调的，实验是她的实验，从头到尾应该由她一人完成！

林萧然也没闲着，他趁此功夫打开电脑，开始按照脑海中的记忆，查询起生物试剂供应商的联络方式。

他在美津供职八年，在试剂小组工作，对于市场主流生物制剂供应商非常熟悉，查找起来相当轻松。

不多时，一家家比较靠谱的试剂供应商，出现在屏幕，林萧然择重点记了下来。

也许黄薇发现小师弟太好用了，用起来没有一点心理负担，因此，问题一个接着一个！

“萧然，过滤好像需要气泵，我们实验室没有啊，其他教研室倒是有，但设备太大，不方便借来吧！”黄薇望看向林萧然，茫然问道。

“用不上气泵，水抽子就行，那玩艺儿足够用！”林萧然侧过头，答道。

“萧然，我们要用三角瓶吗？可是我们没有二氧化碳摇床，溶解氧怎么解决？”

“知道我们没有二氧化碳摇床，就不摇了呗，用二氧化碳培养箱将就一下，溶解氧低的问题……，直接用平皿培养吧，增养基液较浅，有利于氧交换，同时还可以节省培养基，那东西挺贵的，省得陆老板心疼。”

“在平皿里面……，放液体培养基？没有这样做过啊，感觉挺新鲜，能行吗？”

……

“萧然，查资料的时候发现，有些培养基配方用到牛血清，有些却没有，为什么啊？”

“在申请临床批文阶段，细胞基因重组表达抗体蛋白时，不允许培养基出现牛血清成分！”

“到底采用哪种配方呢？”

“我们只是做细胞悬浮驯化！”

“也就是可以使用牛血清配方？”

“……”林萧然。

时间一分一秒过去，近两个小时，实验方法尚未完全缕清，但没关系，明天还可以继续完善，关键是，黄薇终于停下了手头工作。

林萧然长长呼出一口气，暗叹，师姐不发怒的时候，同样麻烦！